服務(wù)介紹：
人源細(xì)胞接種到裸鼠皮下，成瘤后以此為模型進(jìn)行疾病發(fā)生機制和藥物篩選的研究。目前腫瘤化療所應(yīng)用的大多數(shù)藥物，都經(jīng)動物移植性腫瘤試驗而被發(fā)現(xiàn)，因此裸鼠皮下瘤模型是篩選抗腫瘤新藥中最常用的模型。
實驗中心：江蘇瀚江生物
實驗動物選擇：BALB/c-nu裸小鼠 ,隨著裸小鼠年齡增長或有關(guān)因素的影響(如病毒感染),裸鼠體內(nèi)正常T細(xì)胞會增加，一般采用4--6周齡的裸鼠，體重16-18g左右。
細(xì)胞狀態(tài)：選擇生長狀態(tài)良好的細(xì)胞，處于對數(shù)生長期，密度達(dá)到80-90%左右。在收集細(xì)胞前一天晚上更換新鮮培養(yǎng)基。
細(xì)胞處理：用胰酶消化細(xì)胞后，用預(yù)冷的PBS洗兩遍，去除殘余血清。然后用PBS或無血清培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞濃度至1-5×10^7個細(xì)胞/ml。如有條件，可加入基質(zhì)膠加速瘤塊生成。
接種細(xì)胞：盡快將細(xì)胞接種到裸鼠皮下，半小時內(nèi)完成。途中將細(xì)胞懸液放在冰上保持活性。種植部位選擇血供豐富的區(qū)域，如腋窩中后部。
接種技巧：接種前充分吹散細(xì)胞懸液，防止細(xì)胞成團(tuán)。針頭在皮下進(jìn)針約1cm深，左右滑動幾次，以便細(xì)胞接種成團(tuán)。
固定裸鼠：左手捏緊裸鼠頸背部皮膚，小拇指夾住尾巴。
腫瘤觀察：接種后1-2周可觀察到皮下腫塊。根據(jù)腫瘤細(xì)胞特性和接種量，成瘤周期為1-2個月。腫瘤大小不宜超過2000mm3。
腫瘤測量：每周測量兩次腫瘤大小，使用游標(biāo)卡尺測量最長和最短部位。體積計算公式：V=1/2×a×b2（a為長軸，b為短軸）。
樣本處理：皮下瘤取下后，一部分凍存于液氮中用于提取蛋白和RNA，另一部分用福爾馬林固定用于免疫組化、免疫熒光等實驗。
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