細胞凋亡通常稱為細胞程序性死亡，是由基因控制的主動性細胞死亡過程。越來越多數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，細胞凋亡與多種疾病密切相關，如癌細胞具有連續(xù)增殖、抵抗細胞凋亡能力，利用流式細胞儀分析細胞凋亡可為腫瘤診斷，療效評價和預后預測提供了重要的參考指標。
Annexin V和PI雙染法是流式檢測細胞凋亡的經(jīng)典方法，它是基于凋亡的早期細胞膜上的磷脂酰絲氨酸（phosphotidylserine, PS）從細胞膜的內(nèi)側翻轉到細胞膜的表面這一原理來實現(xiàn)的。
Annexin Ⅴ（膜聯(lián)蛋白 V）是一種分子量為35-36 kDa的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白，能與PS高親和力結合，將Annexin V 進行熒光素FITC標記，利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發(fā)生。
碘化丙啶（Propidium, PI）是一種可與DNA結合的染料，它不能透過正常細胞或早期凋亡細胞的完整的細胞膜，但在凋亡中晚期的細胞和死細胞，PI 能夠透過細胞膜而使細胞核紅染。
實驗操作步驟
注意事項
1、誘導培養(yǎng)細胞時間要準確。
2、AnnexinV是光敏物質，在操作時要注意避光。
3、細胞凋亡是一個動態(tài)的過程，反應一小時后熒光強度就開始衰變，熒光顯微鏡下觀察細胞時，由于熒光易碎滅，觀察時要盡量快。
4、整個操作過程動作要盡量輕柔，切勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作。
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