結(jié)直腸癌（colorectal cancer，CRC）是最常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤之一，發(fā)病率及死亡率在全球惡性腫瘤排名前三。近二十年來(lái)，由于人口增長(zhǎng)、衰老及生活方式的改變等，結(jié)直腸癌發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅著人類(lèi)的健康。
結(jié)直腸癌小鼠模型能夠模擬人體結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展，在疾病發(fā)生機(jī)理研究，藥物新靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)及臨床前藥效學(xué)評(píng)價(jià)等方面具有十分重要的理論價(jià)值和臨床意義，結(jié)直腸癌模型主要分為移植瘤模型和原發(fā)瘤模型兩種。
結(jié)直腸癌移植瘤模型就是將人體或小鼠原發(fā)的結(jié)直腸癌組織或細(xì)胞移植到小鼠身上使其生長(zhǎng)成腫瘤的動(dòng)物模型。該模型目前在實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)用較為廣泛，根據(jù)移植物來(lái)源可分為同種移植和異種移植。同種移植采用鼠源組織或細(xì)胞，異種移植采用人源組織或細(xì)胞，更接近人體腫瘤真實(shí)情況，也因此更受歡迎，但其需要免疫缺陷小鼠作為宿主。
目前人源性結(jié)直腸癌移植瘤（異種移植）模型主要分為兩種：
①CDX模型（cell-line-derived xenograft），將人源的結(jié)直腸癌細(xì)胞系接種到免疫缺陷小鼠體內(nèi)，用作CDX模型的人源結(jié)直腸癌細(xì)胞系易獲取，成瘤效果好，驗(yàn)證數(shù)據(jù)詳實(shí)（有大量細(xì)胞功能學(xué)和藥效數(shù)據(jù)可供參考），操作簡(jiǎn)單、成本低，在各類(lèi)實(shí)驗(yàn)室中都有使用。
②PDX模型（patient-derived xenograft），將來(lái)源于患者的結(jié)直腸癌組織塊接種到免疫缺陷小鼠體內(nèi)。
結(jié)直腸癌PDX模型在組織病理學(xué)、癌基因表達(dá)及對(duì)藥物反應(yīng)上均可較好地復(fù)制原發(fā)腫瘤的生物學(xué)特點(diǎn)，具有較好的臨床預(yù)見(jiàn)性。
根據(jù)移植部位，又可分為異位移植（皮下、尾靜脈、脾臟等）和原位移植（盲腸）。
脾臟肝轉(zhuǎn)移模型造模方法
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇
BALB/c 雌性 5周齡
實(shí)驗(yàn)操作步驟
1.麻醉小鼠
2.制作上腹斜切口
3.分離脾臟，輕輕牽拉至體外，放置在用生理鹽水濕潤(rùn)的紗布上
4.細(xì)胞注射
5.觀察反應(yīng)，可看到注射部位脾臟被膜出現(xiàn)腫脹和變白
6.復(fù)位脾臟
7.傷口無(wú)菌縫合
8.麻醉清醒后將小鼠移回SPF級(jí)飼養(yǎng)環(huán)境中繼續(xù)飼養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)
1、體重曲線 接種后每周稱重小鼠2-3次
2、活體成像 根據(jù)活體數(shù)據(jù)分析，明顯看到肝臟和脾臟部位都有熒光圖像
3、術(shù)后破腹觀察拍照 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后拍攝脾臟和肝臟照片，有明顯腫塊，說(shuō)明造模成功
4、組織病理染色 結(jié)腸組織行HE染色后，對(duì)比正常組與模型組
原發(fā)瘤模型
在藥物篩選、藥效評(píng)價(jià)或臨床預(yù)測(cè)方面，移植瘤顯然有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。但若我們想探究結(jié)直腸癌發(fā)生或轉(zhuǎn)移的內(nèi)在機(jī)理，顯然原發(fā)瘤模型更為適合。目前主流的結(jié)直腸癌原發(fā)瘤模型分為化學(xué)誘發(fā)型模型和基因工程小鼠模型。
化學(xué)誘發(fā)型模型是在實(shí)驗(yàn)條件下，人為地運(yùn)用各種致癌因素，通過(guò)口服、注入、埋藏和涂抹等方式誘發(fā)動(dòng)物發(fā)生腫瘤。其制作方法相對(duì)簡(jiǎn)單，重復(fù)性好，可以在較短時(shí)間內(nèi)大量復(fù)制，而且基本模擬癌變的過(guò)程，因此在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用較廣。
目前，常用的結(jié)腸癌化學(xué)誘導(dǎo)劑有二甲基肼（dimethylhydrazine, DMH）、氧化偶氮甲烷（azoxymethane, AOM）及致炎劑葡聚糖硫酸鈉（dextran sulfate sodiuln, DSS）等。
基因工程型即應(yīng)用分子生物學(xué)手段對(duì)結(jié)直腸癌發(fā)生相關(guān)的基因進(jìn)行編輯，如外源癌基因的導(dǎo)入和細(xì)胞內(nèi)抑癌基因的敲除等建立的結(jié)直腸癌動(dòng)物模型。該類(lèi)模型特異性高，在發(fā)展機(jī)制中有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，腫瘤的發(fā)生發(fā)展在理論上與原發(fā)腫瘤一致的，且可對(duì)任何動(dòng)物進(jìn)行建模；但由于目前對(duì)癌基因及抑癌基因本身的研究還有待深入，建立的模型還不夠理想，造價(jià)較貴，短期內(nèi)很難普及。
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