造模方式:
顱腦打擊致顱腦損傷
動物品系:
SPF級SD大鼠,健康,雄性,體重為180g~200g
實驗分六組:
正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組
實驗周期:7d
建模方法
1. 稱量大鼠,腹腔麻醉,頭部正中剃毛后用碘酒及酒精擦拭手術(shù)區(qū)域。
. 沿頭部正中稍偏右切開頭皮約2cm,鈍性分離軟組織及骨外膜后暴露顱骨,在人字縫前方2 mm,顱骨中線旁2 mm,用顱骨鉆打開直徑為4 mm的圓形骨窗,保持硬腦膜完好無損,采用自由落體撞擊至腦挫傷的方法。
3. 用一個40g的金屬重物自25cm高處垂直墜落,撞擊置在硬腦膜上的圓柱體,致傷沖擊力為 1000g·cm造成右頂葉腦挫裂傷,致傷面積為4mm×4mm,致重度腦損傷,然后用骨蠟封閉骨窗,縫合頭皮。
4. 待大鼠蘇醒后自由飲水,正常飼養(yǎng)。
5. 對照組僅作右頂葉相應(yīng)部位顱骨開窗,不致傷。
樣本采集:
1.血液標(biāo)本留?。悍謩e于術(shù)后24h、72h及7d水合氯醛麻醉大鼠后,于下腔靜脈取血2ml,室溫靜置2h后于4℃ 3000r離心10分鐘提取血清,放入-80冰箱凍存。
2.腦組織標(biāo)本留?。喝∧X后用4%多聚甲醛溶液固定,蔗糖溶液脫水后,經(jīng)OCT包埋做冰凍切片,切片10um。